Impuretés du sémaglutide

Impuretés du sémaglutide|Contrôle des impuretés du siméglutide|Synthèse personnalisée d'impuretés et confirmation de la structure|Science-Peptide

Contrôle des impuretés du Soma Lutide (Simeglutide) - pour l'étude de qualité des médicaments BPL-1, soumission de médicament générique. Science-Peptide fournit une synthèse personnalisée des impuretés liées au Soma Lutide, y compris les peptides manquants, les impuretés oxydées, les produits d'exfoliation des acides gras, les impuretés liées à la chaîne PEG, etc., accompagnées de données de confirmation structurelle. Nous pouvons vous aider dans votre recherche de profil d’impuretés. Bienvenue à nous contacter.

Le sémaglutide (également connu sous le nom de sémaglutide) est en feu ces années-ci. Novo Nordisk compte sur lui pour pousser la valeur marchande au deuxième rang mondial des fabricants nationaux de génériques peptidiques, presque sans le regarder. Les formes posologiques orales et injectables sont toutes des marchés importants. Après l'expiration du brevet, qui pourra en premier faire la recherche de qualité, qui aura l'opportunité de s'emparer du premier générique.

 

Cependant, l’étude qualitative de la somatostatine est, à vrai dire, plus difficile que celle de nombreux peptides. Il s'agit d'un 31-peptide avec une chaîne d'acide gras (acide octadécanedioïque) et un lieur PEG. Cette structure détermine que son spectre d'impuretés est particulièrement riche - peptides manquants, impuretés oxydées, produits d'excrétion d'acides gras, impuretés liées à la chaîne PEG, les dimères doivent chacun avoir un contrôle, chacun doit être clair. En particulier, la chaîne PEG, que l'on ne trouve pas dans les peptides ordinaires, est unique au Somalutide.

 

Nous avons accumulé beaucoup d'expérience dans la synthèse d'impuretés peptidiques complexes. Nous nous sommes spécialisés dans l'étude de la somatostatine, et nous savons quelles sont les difficultés de son profil d'impuretés et quels sont les éléments de contrôle essentiels. Nous pouvons personnaliser la synthèse de divers contrôles d'impuretés de sémaglutide en fonction de vos besoins, avec des données de confirmation structurelle, et vous aider à établir la méthode, afin que vous soyez moins susceptible de recevoir un supplément lors du dépôt.

La structure moléculaire de la somatostatine détermine que son profil d'impuretés est beaucoup plus complexe que celui des peptides ordinaires. Lorsque nous effectuons des études d’impuretés, nous nous concentrons principalement sur ces catégories :

Peptide manquant
Les 31 acides aminés, dont chacun est manqué lors du processus de synthèse, constituent une impureté. Les temps de rétention des peptides manquants sur HPLC étaient largement distribués, avec différentes polarités des peptides manquants dans différentes positions. Certains manquent à l'extrémité N-, d'autres au milieu et d'autres près du site de fixation des acides gras. Nous avons reçu une commande d'un client qui demandait une douzaine de peptides manquants dans différentes positions pour localiser toutes les impuretés manquantes possibles dans son processus.

Impuretés oxydantes
Le somalutide contient de la méthionine (Met) dans sa séquence, qui est susceptible de s'oxyder en sulfoxyde puis en sulfone. Les impuretés oxydées apparaissent souvent dans les études de stabilité et se développent après un certain temps. Nous avons fait une comparaison, dans des conditions accélérées pendant un mois, le pic d'oxydation peut croître jusqu'à plus de 0,3%, sans contrôle.

Produits d'élimination des acides gras
La chaîne latérale d'acide gras (acide octadécanedioïque) de la somatostatine est attachée à la lysine par l'intermédiaire d'un lieur, et cette modification peut être partiellement éliminée lors de la synthèse ou du stockage. De manière plus problématique, l'excrétion peut se produire à différents endroits - entre l'acide gras et le lieur, et entre le lieur et le peptide -, ce qui entraîne différentes impuretés. Nous avons synthétisé plusieurs impuretés liées aux acides gras-pour nos clients, allant de l'excrétion complète à une petite partie seulement.

Impuretés liées à la chaîne PEG-
Il s’agit du type d’impureté le plus spécifique de la somatostatine. Il possède un lieur PEG (polyéthylène glycol), et la chaîne PEG peut se briser, se raccourcir ou se polymériser pendant la synthèse, entraînant une série d'impuretés associées. Ces impuretés ne se trouvent pas dans les peptides ordinaires, mais sont uniques à la somatostatine et sont difficiles à étudier dans le cadre d'études de qualité. Nous avons réalisé diverses variantes de suppression de chaîne PEG, de raccourcissement de chaîne PEG et d’oxydation de chaîne PEG.

Dimères/polymères
Deux ou plusieurs molécules de somatostatine se regroupent pour former un dimère ou plus. Le poids moléculaire du dimère est deux fois supérieur à celui du pic principal, et il s'agit souvent d'un pic large en HPLC, il doit donc être spécialement séparé et purifié avant de pouvoir être utilisé comme contrôle. Nous avons préparé des dimères et il a fallu plusieurs cycles de purification pour atteindre une pureté de plus de 95 %.

Impuretés désamidées
L'asparagine (Asn) et la glutamine (Gln) sont facilement désamidées dans des conditions acides ou thermiques, ce qui donne naissance à des isomères. Il existe plusieurs Asn et Gln dans la séquence de la somatostatine, et l'impureté de désamidation apparaît souvent dans le test de dégradation forcée, le produit témoin doit donc être utilisé pour localiser l'impureté.

Diastéréoisomères
Au cours de la synthèse à longue chaîne, les acides aminés individuels peuvent subir une racémisation, entraînant la formation de diastéréoisomères. La teneur de ce type d'impuretés n'est généralement pas élevée, mais les experts le demanderont lors de la déclaration, et il est préférable d'avoir un produit de contrôle pour confirmation.

Beaucoup de ces impuretés ne peuvent pas être achetées et doivent être synthétisées sur mesure. Nous avons déjà réalisé de nombreux projets sur la personnalisation des impuretés de la somatostatine, couvrant toutes les catégories ci-dessus.

La suppression de la série peptidique
We synthesize whatever is missing. For example, the lysine at position 20 is missing, or the amino acid near the fatty acid attachment site is missing. We will synthesize according to your process impurity profile, and the purity is usually >95 %, avec confirmation MS et RMN. Nous avons synthétisé un ensemble de peptides avec un espacement de 5 acides aminés du N-terminal au C-terminal.

Impuretés oxydantes
Met in Somatostatin is oxidized to sulfoxide or sulfone, and we can control the oxidation conditions and synthesize the oxidized control product. We can control the oxidation conditions and synthesize the oxidized control product. The purity of the product is >95 %, et nous pouvons fournir le spectre LC-MS pour confirmer le degré d'oxydation. Le sulfoxyde et la sulfone sont séparés par HPLC, et nous pouvons faire les deux.

Produits d'élimination des acides gras
C’est le foyer principal des impuretés Somalutide. La chaîne des acides gras peut être totalement ou partiellement délogée. On peut synthétiser une série de variantes pour différentes positions de délestage. Dans l'un des projets les plus compliqués que nous ayons jamais réalisés, le client nous a demandé de synthétiser une impureté avec 6 carbones manquants dans la chaîne des acides gras, et il nous a fallu deux mois pour y parvenir.

Impuretés liées à la chaîne PEG-
C’est l’une des impuretés les plus difficiles de la somatostatine, et c’est aussi notre force. La chaîne PEG peut être manquante, raccourcie, cassée, oxydée et diverses variantes peuvent être produites. Nous avons éliminé l'impureté avec la chaîne PEG complètement manquante (c'est-à-dire la somatostatine dé-PEGylée), la variante avec la longueur de la chaîne PEG réduite de moitié et le produit avec la chaîne PEG oxydée. Le client a reçu ces contrôles et le spectre de l'impureté liée au PEG-a été entièrement établi.

Dimère
Les dimères formés par-réticulation ou interactions non-covalentes peuvent être préparés par différentes méthodes et isolés et purifiés pour fournir des contrôles de haute pureté. Les dimères sont laborieux à purifier, mais nous avons l'expérience pour savoir séparer les monomères.

Impuretés désamidées
Pour les sites Asn et Gln de la séquence, nous pouvons préparer des contrôles d'impuretés désamidées par dégradation forcée ou synthèse ciblée. La différence de poids moléculaire après désamidation n'est que de 1, ce qui n'est pas facile à distinguer par MS, nous utilisons donc généralement la RMN ou des conditions chromatographiques spéciales pour confirmer.

Autres impuretés personnalisées
Si vous trouvez une nouvelle impureté inconnue dans vos recherches, nous pouvons vous aider à analyser la structure et à la synthétiser. Envoyez-nous l'échantillon, nous effectuerons l'analyse LC-MS, spéculerons sur la structure, puis la synthèse directionnelle, puis comparerons le temps de rétention et le spectre de masse pour confirmer l'accord. Nous avons effectué ce processus à plusieurs reprises et le taux de réussite est assez élevé.

Développement et validation de méthodes analytiques
Lors de la mise en place d'une méthode HPLC ou LC-MS, un contrôle des impuretés est requis pour la localisation, la détermination de la séparation, la vérification de la plage linéaire et la récupération. Sans contrôle, il manque un élément à la validation de la méthode. De nombreux clients nous demandent d'abord de traiter quelques impuretés clés pour configurer la méthode, puis de composer lentement le reste.

Spectrométrie de masse hétérogène
Lorsqu'un médicament générique est déclaré, une analyse qualitative et quantitative complète des impuretés du processus et des produits de dégradation est requise. L'emplacement, le contenu et la structure de chaque impureté doivent être confirmés par un produit de contrôle. Nous avons vu que la déclaration des informations a été envoyée pour rattraper, neuf fois sur dix les impuretés de cette pièce n'ont pas été comprises.

Etudes de stabilité
Dans les tests de stabilité à long terme et les tests accélérés, il est nécessaire de déterminer quels produits de dégradation sont dominants et quelle est la tendance du contenu. Avec un contrôle des impuretés, il est possible de quantifier et de surveiller avec précision. Un client étudiait la stabilité de la préparation de somatostatine et a constaté qu'un pic de dégradation augmentait rapidement dans des conditions accélérées. Nous l'avons donc analysé par MS et l'avons synthétisé pour confirmer la structure, puis le client s'est senti soulagé de le signaler.

Tests de libération par lots
Après la commercialisation, chaque lot d’API ou de formulation doit être testé pour la substance en question. Les contrôles d’impuretés sont des outils essentiels pour les tests de version.

Informations sur les déclarations de médicaments génériques
Les études d’impuretés constituent une section clé des informations de dépôt. Fournir des données complètes de profilage et de contrôle des impuretés réduit considérablement le risque d’une publication pour examen.

Cas 1 : Une société pharmaceutique, programme de médicaments génériques Somalutide
Ils développent une version générique de la somatostatine et ont besoin d'un ensemble complet de contrôles d'impuretés pour la validation de la méthode. Nous avons personnalisé 15 impuretés pour eux : 6 peptides manquants, 2 impuretés oxydées, 1 dimère, 2 produits d'exfoliation d'acides gras, 3 impuretés liées à la chaîne PEG et 1 impureté de désamidation. La pureté de chacun était supérieure à 95 %, avec des données MS et RMN. Le chef de projet a déclaré : « Les impuretés du Somalutide sont plus compliquées que celles d'autres peptides, en particulier celui du PEG, que nous avons recherché auprès d'un certain nombre d'entreprises, mais elles ont toutes dit qu'elles ne pouvaient pas le faire. Mais vous avez pu tout faire et les données étaient complètes, ce qui a été d'une grande aide. Par la suite, la validation de leur méthode s'est achevée avec succès et ils se préparent désormais au dépôt.

Cas 2 : Un CRO, étude particulière sur les impuretés de la chaîne PEG
Ils ont entrepris un projet de recherche de qualité sur la somatostatine, qui a nécessité une analyse complète des impuretés associées à la chaîne PEG. Nous avons systématiquement synthétisé les impuretés liées au PEG- : absence totale de chaîne PEG, réduction de moitié de la longueur de la chaîne PEG, oxydation des extrémités de la chaîne PEG et rupture de la chaîne PEG en deux parties. synthétisé un total de 8 impuretés liées au PEG-. Le client a utilisé ces contrôles pour établir un ensemble complet de méthodes de détection des impuretés PEG, qui sont devenues le point culminant de leurs informations de dépôt.

Cas 3 : Etudes de stabilité, une entreprise de biotechnologie
Ils effectuaient une étude de stabilité de la formulation de somatostatine et ont découvert que la teneur en produit de dégradation augmentait rapidement dans des conditions accélérées, mais ils ne savaient pas de quoi il s'agissait. Nous avons analysé l'échantillon par LC-MS, supposé qu'il s'agissait d'un acide gras excrétant une impureté à un certain endroit, puis l'avons synthétisé de manière ciblée et l'avons confirmé par comparaison. Ils ont établi un test utilisant ce contrôle et ont surveillé avec précision la tendance de ce produit de dégradation. Plus tard, lors de la soumission du rapport, cette partie des données a été soulignée par les experts et, en raison de la solidité des données, aucune compensation n'a été versée.

La somatostatine est un produit très populaire, mais l'étude des impuretés est un travail délicat, en particulier les impuretés liées à la chaîne PEG et les produits d'exfoliation des acides gras, que de nombreux fabricants ne peuvent pas gérer. Si vous effectuez des recherches de qualité ou un développement générique de la somatostatine et avez besoin d'un contrôle des impuretés, n'hésitez pas à nous en parler. Nous avons fait beaucoup de travail, nous connaissons les difficultés et nous savons comment les surmonter.